絕大多數(shù)ELISA試劑盒使用以下幾種策略：

1）夾心ELISA：用于檢測(cè)目的抗原的量。其優(yōu)點(diǎn)是避免了對(duì)特異性抗體的直接標(biāo)記，但增加了操作步驟和測(cè)定時(shí)間。

2）間接ELISA：用于篩檢抗體（抗特定抗原成份的特異性抗體）此法是測(cè)定抗體常用的方法。

3）競(jìng)爭(zhēng)ELISA：用于確定抗原特異性或待檢標(biāo)本中含交叉反應(yīng)成份時(shí)為了提高實(shí)驗(yàn)的特異性而使用的一種方法。根據(jù)標(biāo)記抗原和同種未標(biāo)記的待測(cè)抗原和抗體間發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的原理，主要用于測(cè)定小分子抗原。

科研細(xì)菌羧酸酯酶(CES)ELISA檢測(cè)試劑盒采用抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被羧酸酯酶（CES）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的羧酸酯酶（CES）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品活性。

科研細(xì)菌羧酸酯酶(CES)ELISA檢測(cè)試劑盒組成及試劑配制：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、50、100、200、400、800 U/mL

1. 酶標(biāo)板（Microelisa stripplate）：一塊（96孔或者48孔）

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：0.3ml*6管或者0.3ml*6管

3. 稀釋液（Sample Diluent）：6ml或者3ml

4. 檢測(cè)抗體-HRP（HRP-Conjugate reagent）：10ml或者5ml

5. 20x洗滌緩沖液（20X Wash solution）：25ml或者15ml（按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋?zhuān)?/p>

6. 底物A（Chromogen Solution A）：6ml或者3ml

7. 底物B（Chromogen Solution B）：6ml或者3ml

8. 終止液（Stop Solution）：6ml或者3ml

9. 封板膜（Closure plate membrane）：2張

10. 說(shuō)明書(shū)（User manual）：1份

11. 自封袋（Sealed bags）：1個(gè)

實(shí)驗(yàn)需自備器材:
1、450nm酶標(biāo)儀。
2、37℃恒溫箱。
3、系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器。
4、干凈的試管和Eppendof管。
5、用去離子水將25X洗滌緩沖液稀釋25倍,成1X洗滌緩沖液。

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